DMEM高糖培養液

DMEM高糖培養液

DMEM培養基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基，是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長，適于生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。 [1] 

DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫，所以其特點主要包括以下:(1)氨基酸含量為依格爾培養基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等;(2)維生素含量為依格爾培養基的4倍;3)含有糖酵解途徑中的重要物質--丙酮酸;(4)含有微量的鐵離子。
 

經典的培養基有很多種，其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用廣泛的培養基。其他 如 M199 、 IMDM 、 L15培養基等也用于某些細胞的培養。其具體的特征及應用如下：

1、BME細胞培養基

基礎Eagle培養基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle設計，BSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素。簡單、便于添加，適于各種傳代細胞系和特殊研究用，在此基礎上改良的細胞培養基品種有MEM、DMEM、IMDM等。

2、MEM細胞培養基

又稱*Eagle培養基（Minimal Essential Medium），1959年在Eagle's基礎培養基（BME）上修改而來，刪去賴氨酸、生物素，氨基酸濃度增加，適合多種細胞單層生長，有可高壓滅菌品種，是一種基本、試用范圍廣的培養基，但因其營養成分所限，針對生產之特定細胞培養與表達時，并不一定是使用效果佳或者經濟的培養基。

3、DMEM細胞培養基

DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養基，起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。

低糖適于依賴性貼壁細胞培養，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。高糖更適合高密度懸浮細胞培養，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。例如CHO細胞表達生產乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。

4、IMDM細胞培養基

Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium，用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞，LPS刺激的B細胞，骨髓造血細胞，T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養非常豐富的培養液，因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養。

5、RPMI 1640培養液

Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制，針對淋巴細胞培養設計，含BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等?，F也用于懸浮細胞培養，如哺乳動物、特殊造血細胞、正?；驉盒栽錾陌准毎?，雜交瘤細胞的培養，其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

6、HamF10細胞培養基

1963年Ham設計，含微量元素，可在血清含量低時用，適用于克隆化培養。F10適用于倉鼠、人二倍體細胞，特適于羊水細胞培養。

7、DMEM/F12細胞培養基

Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物，這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。由于營養成分豐富，且可以使用較少血清，故也常作為無血清培養基的基礎培養基。

8、M199細胞培養基

1950年Morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養液，即M-199。除BSS外，含有53種成分，為全面培養基，主要用于雞胚成纖維細胞培養。此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞，并能培養轉染的細胞?，F廣泛用于病毒學、疫苗生產。

9、McCoy5A培養基

1959年MeCoy為肉瘤細胞設計，BSS＋40種成分?？芍С侄喾N（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養外，主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。

10、L15 細胞培養基

L-15培養液適用于快速增殖瘤細胞的培養，用于在CO2缺乏的情況下培養腫瘤細胞株。此培養液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

DMEM高糖培養液

至于選擇何種培養基并沒有一定的標準，有幾點建議可供參考：

(1)建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞的培養基?？梢圆殚唴⒖嘉墨I，或在購買細胞株時咨詢。也可以在一些生物公司的網站上搜索，如Invitrogen網站上有一個Cell Line Database的工具，選擇你感興趣的細胞類型，它就會彈出推薦的培養基、血清和轉染試劑等，有時還有優化好的轉染步驟，很方便。

(2) 其它實驗室慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。

(3) 根據細胞株的特點